Bộ phim lấy bối cảnh ở một vùng đất xinh đẹp giả tưởng có tên là Equestria- là nơi các pony sinh sống- do công chúa Celestia và công chúa Luna cai trị. Bộ phim xoay quanh câu chuyện về 6 nhân vật chính gồm: công chúa Twilight Sparkle thông minh, Rarity rộng lượng, Applejack thật thà, Pinkie Pie vui tính, Fluttershy nhút nhát và Rainbow Dash trung thành và những bài học về tình bạn qua mỗi câu chuyện đó.

Cutie Mark

"Cutie Mark"- hay còn gọi là dấu duyên - là một biểu tượng đặc biệt xuất hiện trên phần hông của những chú ngựa một khi họ phát hiện ra tài năng đặc biệt của mình trong cuộc sống. Có một tập phim nói về cách mà 6 nhân vật chính nhận được dấu duyên của họ khi còn nhỏ. Và một vài tập phim tập trung vào một nhóm gồm 3 cô ngựa con mà họ tự gọi mình là "Cutie Mark Crusaders" (Đội Duyên Tự Chinh), những chú ngựa này vẫn chưa tìm được dấu duyên của mình và bị trêu chọc là "blank flanks" (hông trống), bộ ba này thường làm việc chung và tham gia các hoạt động cùng nhau để khám phá ra tài năng đặc biệt của họ. Vào phần 5, họ đã tìm ra dấu duyên của mình và dấu duyên của họ đã xuất hiện cùng lúc.